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GFP是綠色熒光蛋白，在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會發(fā)出綠色熒光，從而可以地定位蛋白質(zhì)的位置。綠色螢光蛋白（GFP）是一個由約238個氨基酸組成的蛋白質(zhì)，從藍光到紫外線都能使其激發(fā)，湖北亞細胞定位，發(fā)出綠色熒光。通過基因工程技術(shù)，綠色螢光蛋白(GFP)基因能轉(zhuǎn)進不同物種的基因組，在后代中持續(xù)表達，蛋白亞細胞定位，并且能根據(jù)啟動子特異性地表達。
使用GFP必須構(gòu)建融合蛋白載體，并在轉(zhuǎn)染之后有效表達。這樣，若在熒光顯微鏡下看到細胞內(nèi)某一部位存在GFP信號，說明和GFP融合的蛋白也存在于該部位，這樣就達到了確定某物質(zhì)亞細胞定位的目的。
洋蔥亞細胞定位的方法包括但不限于以下三種：
熒光法：利用抗原與的特異性結(jié)合，在細胞內(nèi)產(chǎn)生熒光標記，從而確定細胞內(nèi)抗原的分布位置。
GFP融合蛋白表達法：將目的蛋白與綠色熒光蛋白(GFP)融合，通過熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白的表達位置。
亞細胞分離法：通過一定的物理或化學(xué)方法，將細胞進行破碎，然后通過離心、密度梯度離心等方法將細胞器分離出來，再對分離出來的各個細胞器進行成分和結(jié)構(gòu)分析。
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