原位雜交(In situ hybridazation)
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收集斑馬魚的胚胎,在Holfretor水中培養(yǎng),到達(dá)所需要的發(fā)育時期時,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,熒光原位雜交,二十四小時后用50%2%多聚甲醛溶液洗,染色體熒光原位雜交,然后換成,在-20C 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用處理,去除色素?;蛘呤褂帽斤畴逑∪芤号囵B(yǎng),原位雜交,可阻斷色素的形成)
原位雜交是一種生物學(xué)技術(shù),它可以在細(xì)胞或組織中特定部位檢測DNA或RNA的存在,而不需要將DNA或RNA分離出來。這項(xiàng)技術(shù)使用標(biāo)記的DNA或RNA探針,與細(xì)胞或組織中的相應(yīng)DNA或RNA進(jìn)行特異性結(jié)合,植物原位雜交,然后通過光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡觀察探針的位置和數(shù)量。
原位雜交的原理很簡單。DNA或RNA分子具有互補(bǔ)的核苷酸序列,因此可以通過氫鍵相互結(jié)合。將標(biāo)記的DNA或RNA探針與細(xì)胞中的DNA或RNA進(jìn)行雜交,可以特異性地檢測這些探針的位置和數(shù)量。探針的數(shù)量和位置可以反映DNA或RNA在細(xì)胞中的水平和分布。
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